Polimeraza ĉena reago, mallongigita kielPCRen la angla, estas molekula biologia tekniko uzata por plifortigi specifajn DNA-fragmentojn.Ĝi povas esti rigardata kiel speciala DNA-reproduktado ekster la korpo, kiu povas multe pliigi tre malgrandan kvanton de DNA.Dum la tutaPCRreakcia procezo, unu klaso de substancoj ludas esencan rolon - enzimoj.
1. Taq DNA
En eksperimentoj en la fruaj tagoj dePCR, sciencistoj uzis Escherichia coli DNA-polimerazo I, Sed estas problemo kun ĉi tiu enzimo: ĝi bezonas replenigi novan enzimon ĉiufoje kiam oni faras ciklon, kio faras la operaciajn paŝojn iomete komplikaj kaj estas malfacile plene aŭtomate pligrandigi.Ĉi tiu problemo estis solvita post kiam sciencistoj hazarde izolis Taq DNA-polimerazon de Thermus aquaticus en 1988. Ekde tiam, la aŭtomata plifortigo de DNA fariĝis realo.La malkovro de ĉi tiu enzimo ankaŭ farasPCRteknologio oportuna, praktika kaj universala teknologio.Nuntempe, Taq DNA-polimerazo estas la plej ofta polimerazo en DNA-kompletoj.
2. PfuDNA
Kiel menciite supre, Taq DNase havas grandan cimon, do sciencistoj modifis Taq DNA-polimerazon certagrade por eviti nespecifan plifortigon pro miskongruo, rezultigante malprecizajn testrezultojn.Sed la modifo de Taq DNA-polimerazo povas malhelpi la agadon de DNA-polimerazo ĉe ĉambra temperaturo.PfuDNA polimerazo povas bone kompensi la suprajn malavantaĝojn de Taq DNA-polimerazo, tiel ke la PCR-reago povas esti efektivigita normale, kaj la sukcesfrekvenco de celgena plifortigo povas esti efike plibonigita.
3. Inversa transkriptazo
Inversa transkriptazo estis malkovrita en 1970. Tiu enzimo utiligas RNA kiel ŝablonon, dNTP kiel substraton, sekvas la principon de bazparigo, kaj sintezas DNA-unufadenon komplementan al la RNA-ŝablono en la 5′-3′ direkto.Inversa transkriptazo estas ĉefe dependa de DNA-polimeraza agado de DNA aŭ RNA-ŝablonoj kaj tial havas neniun 3′-5′ eksonukleazaktivecon.Tamen, ĝi havas RNase H-agadon, kiu limigas la sintezlongon de inversa transkriptazo certagrade.Pro la malalta fideleco kaj termostabileco de sovaĝa inversa transkriptazo, sciencistoj ankaŭ modifis ĝin.
PorPCReksperimentoj, la ĉefaj konsumeblaj estas: individua PCR-tubo, 4/8-stria PCR-tubo, PCR-platoj.
tiu de LabioPCR-konsumeblajhavas la jenonavantaĝojn:
PCR-platoj: Larĝa termika ciklo-kongruo;Altkontrasta, facila bone identigo;bone fluoreskeca reflekto;bonavarmotransigo;Atestita DNase, RNase, DNA, PCR-inhibitoroj, kaj testita pirogen-libera.
Individuaj PCR-tuboj: Vaporiĝrezista;bonavarmotransigo;bonega optika klareco; Atestita DNazo, RNazo, DNA, PCR-inhibitoroj, kaj testita senpirogena.
4/8-strioj PCR-tuboj: Ultra-maldikaj muroj;alta klareco;bona fluoreskeca reflektado;povas uzi en farmacia industrio, nutraĵa industrio kaj molekula biologio; altkvalita, virga PP-materialo; Atestita DNazo, RNase, DNA, PCR-inhibiciiloj kaj testita senpirogena.
Afiŝtempo: Jun-09-2023